Miglioramento della produzione di una proteina a doppio bersaglio contro il mesotelioma pleurico maligno

Previous studies have reported overexpression of the ADAM-10 protein in human malignant pleural mesothelioma. ADAM-10 is a widespread protein that processes beta-cellulins; therefore, its inhibition may contribute to reduced tumor migration and proliferation. For this reason, NbProD was produced in large quantities for evaluation in a mouse trial to determine whether its inhibition affects cancer cell numbers. NbProD is a recombinant protein composed of a nanobody, which recognizes ADAM-10 in the mesothelium, and a prodomain, a specific inhibitor of the ADAM-10 catalytic site. This thesis focused on optimizing the production protocol of NbProD and scaling up its synthesis for future application in mice.

Studi precedenti hanno dimostrato una sovra-espressione della proteina ADAM-10 nel mesotelioma pleurico maligno umano. ADAM-10 è una proteina ubiquitaria in grado di processare le betacelluline, per cui una sua inibizione potrebbe portare ad una riduzione della migrazione e proliferazione tumorale. Abbiamo pertanto deciso di produrre in massa del NbProD da utilizzare in una sperimentazione sui topi, per vedere se effettivamente la sua inibizione portava ad avere un numero di cellule cancerogene ridotte. Il NbProD è una proteina ricombinante costituita dal nanobody (anticorpo in grado di riconoscere (ADAM-10 nel mesotelio) e dal prodominio (inibitore specifico del sito catalitico di ADAM-10). questa tesi aveva come obiettivo l'ottimizzazione del protocollo di produzione del NbProD e la sua produzione in massa necessario per la successiva applicazione su topi.