SCREENING AD ALTO RENDIMENTO PER L'ESPRESSIONE DI SEI RECETTORI OLFATTIVI DI Danio rerio NELLE CELLULE DI INSETTO

This study delves into the high-throughput characterization of six specific olfactory receptors from Danio Rerio, commonly known as zebrafish, within insect cells. Employing an advanced High-Throughput Screening (HTS) approach, we meticulously examined optimal conditions to facilitate the gene expression of these olfactory receptors. The results not only allowed the establishment of a preliminary HTS protocol but also laid the groundwork for further confirmation and enhancements. In particular, the high-throughput analysis provided a meticulous assessment of translation efficiency of the vectors used and identified the most favorable expression conditions. We successfully pinpointed the optimal conditions for both the expression and detection of the genetic construct, elucidating its effects within the cellular environment. Our findings not only showcased a diverse range of zebrafish olfactory receptor expression in insect cells but also hinted at potential applications in biotechnology and pharmaceutical research. These applications include the identification of novel targets for modulating olfactory behaviors in zebrafish and other related organisms. This study not only offers a detailed overview of specific olfactory receptor expression under controlled conditions but also paves the way for future research in the HTS approach for numerous other proteins within insect cells. The insights gained could be instrumental in developing novel strategies for gene expression manipulation.

Lo studio attuale si concentra sulla caratterizzazione ad alto rendimento di sei recettori olfattivi specifici di Danio Rerio, comunemente noto come pesce zebra, all'interno di cellule di insetto. Utilizzando un approccio di screening avanzato (HTS), sono state esaminate le condizioni migliori per permettere l'espressione genica di questi recettori olfattivi. I risultati hanno permesso di stabilire un protocollo nell'ottica dell'HTS, da confermare e da sottoporre a miglioramenti. In particolare, l'analisi ad alto rendimento ha permesso una valutazione accurata dell'efficienza di traduzione dei vettori utilizzati e le condizioni di espressione migliori per il loro utilizzo. Siamo stati in grado di identificare le condizioni ottimali per l'espressione e la rilevazione del costrutto genico ed i suoi effetti nella cellula. I nostri risultati indicano non solo una diversità nell'espressione di recettori olfattivi di zebrafish nelle cellule d'insetto, ma anche suggeriscono potenziali applicazioni in campo biotecnologico e nella ricerca farmaceutica, quali l'identificazione di nuovi bersagli per il controllo di comportamenti olfattivi nei pesci zebra o in altri organismi correlati. Questo studio non solo fornisce una panoramica dettagliata dell'espressione di specifici recettori olfattivi in condizioni controllate, ma apre anche nuove strade per ulteriori ricerche sull'approccio HTS in cellule d'insetto per numerose altre proteine. Le informazioni ottenute potrebbero essere utilizzate per sviluppare nuovi approcci per la manipolazione dell'espressione genica.