CRISPR/Cas9 e la rivoluzione dell'editing genomico

"Clustered regularly interspaced short palindromic repeats / CRISPR-associated nuclease 9" is an RNA-guide genomic editing tool, initially discovered as an adaptive defense system in bacteria and archaea, which now offers countless advantages over other conventional methods (ZNF, TALEN) at the level of costs, efficiency and ease of use. Despite some limitations, such as the possibility of causing off-target effects, CRISPR-Cas9 still remains the most convenient tool for genomic editing. Thanks to its ability to "cut" DNA in a specific way, it can also be considered an important tool in gene therapy, in particular for the treatment of diseases associated with genomic mutations such as cancer. It is also used in conjunction with chemotherapy agents to sensitize the target cell to the drug. In addition to the various fields of application of CRISPR, in this thesis we also discussed its classification, based mainly on differences at the level of Cas genes, its mechanism of action as a defense system in bacteria and the various transport systems that allow it to enter into the target cells.

«Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9» è uno strumento di editing genomico RNA-guida, scoperto inizialmente come sistema di difesa adattiva in batteri e archei, che ad oggi offre innumerevoli vantaggi rispetto agli altri metodi convenzionali ( ZNF, TALEN ) al livello di costi, efficienza e facilità d’utilizzo. A discapito di alcune limitazioni, come la possibilità di provocare effetti off-target, CRISPR-Cas9 rimane comunque lo strumento più conveniente per gli editing genomici. Grazie alla sua capacità di andare a «tagliare» il DNA in maniera specifica, può essere considerato anche uno strumento importante in terapia genica, in particolare per il trattamento di malattie associate a mutazioni genomiche come per il cancro. Esso viene utilizzato anche insieme a agenti chemioterapici, per sensibilizzare la cellula bersaglio al farmaco. Oltre ai vari campi di applicazione di CRISPR, in questa tesi abbiamo discusso anche della sua classificazione, basata principalmente su differenze al livello dei geni Cas, del suo meccanismo d’azione come sistema di difesa nei batteri e dei vari sistemi di trasporto che gli permettono di inserirsi all’interno delle cellule bersaglio.